PD-1疗效预测高科技——无需肿瘤组织，4ml外周血即可搞定！

2018年是中国癌症患者的免疫元年，包括纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、特瑞普利单抗和信迪利单抗4款抗PD-1抗体在国内争相上市，给国内癌症患者带了了一线希望。

截至目前，美国食品和药物管理局（FDA）也已批准6种抗PD-1/L1单抗用于多种晚期恶性肿瘤的治疗。但是，并不是所有的癌症患者都适用于这种免疫疗法，研究表明仅有20%左右的患者能够获益。

那么，该如何确定自己是不是能获益的那个呢？学术界已经研究出众多的预测疗效的生物标志物，如：PD-L1表达、MSI检测、dMMR检测、TMB检测等。

众所周知，这些生物标记物可以通过取得活体肿瘤组织（或者是手术后的蜡块、切片）进行基因检测，一份综合的全基因检测报告会给您指出PD-L1、MSI、dMMR、TMB的检测结果，并给出是否适合免疫治疗的建议。

PD-L1：免疫组化检测蛋白表达情况（需要肿瘤组织切片）

MSI：免疫组化检测4个蛋白表达情况（MMR检测位点：MLH1、MSH2、MSH6、PMS2）或者二代测序检测基因突变（检测位点：BAT-25、BAT-26、NR-21、NR-24、Mono-27）

TMB：二代测序检测

以上几个生物标记物的检测都需要足量的肿瘤组织，否则，检测结果不敢保证！

那么，如果患者手术时间比较久肿瘤组织失去检测价值，或者肿瘤组织无法切出足够的切片，或者是患者失去手术治疗机会又无法进行穿刺取得肿瘤组织，这时候，患者该如何评估PD-1的有效性呢？是否就无法进行免疫治疗了呢？

不，答案是否定的！不需要肿瘤活检组织也能进行PD-L1检测，这就需要从肿瘤患者外周血提取循环肿瘤细胞（CTC）进行分析，最终确定PD-L1的表达情况，预测免疫治疗效果。

肿瘤监测新手段：基于 CTC 的 PD-L1 检测在癌症免疫领域大放异彩

意大利罗马第一大学的一个研究组近期在《自然》旗下的《科学报告》杂志（影响因子 8.4）发表署名《PD-L1 阳性 CTC 用以检测 PD-1 抑制剂 Nivolumab 的非小细胞肺癌（NSCLC）治疗》文章。在癌症治疗的监测领域做出新发现，对于肿瘤循环肿瘤细胞（CTC）做了更为细致的分层，并且发现这一基于 PD-L1 的划分对于药效监测具有临床应用价值。

主要内容如下

针对肺肿瘤组织对免疫检查点抑制剂 PD-1 抑制剂的应答的预测值一直以来都有争议。而液体活检使患者 PD-L1 的实时取样成为可能。本课题纳入参与 Nivolumab 治疗的二十四名 IV 期 NSCLC 患者，采用 CellSearch 系统，利用 B7-H1 / PD-L1 PE 缀合抗体分析循环肿瘤细胞（CTC）。

在基线和开始治疗后 3 个月和 6 个月分别对表达 PD-L1 的 CTC 进行评估。在基线和治疗 3 个月时，发现 CTC 及其 PD-L1 的表达与患者不良反应的结果相关。然而，CTC 的 PD-L1 高表达同样阻碍了 PD-1 抑制剂在预后中的作用。

相反，治疗后 6 个月所有患者中都发现 CTC，此时患者基于 CTC 上的 PD-L1 表达被为两组。PD-L1 阴性 CTC的患者都获得好的治疗效果，而 PD-L1（阳性）CTC 的患者疾病都进展了。这表明持久的PD-L1（阳性）CTC 可能反映出治疗的逃逸机制。

关于CTC

当肿瘤病灶小于0.5厘米时，传统的CT检查很难观察到。外周血中存在的循环肿瘤细胞（CTC）或循环肿瘤微栓子（CTM）可以用于预测多种肿瘤的病变情况。比传统CT检查能提早2-6个月观察到肿瘤变化，能够及时有针对性地指导患者用药，有效控制肿瘤转移。

新一代技术-肿瘤捕手技术原理

肿瘤捕手机上主要针对外周血样品，进行血液中循环肿瘤细胞的计数和免疫荧光染色的检测，测试流程如下：将特异性识别循环肿瘤细胞表面上皮细胞粘附分子（EpCAM）的多肽修饰的磁性纳米颗粒与血液样品混合，利用磁力捕获血液中的循环肿瘤细胞，通过免疫荧光染色方法对捕获的细胞进行鉴定。

免疫荧光染色为三色标记法，分别为细胞核染色剂（DAPI）、上皮细胞标记物细胞角蛋白（CK）的抗体、以及白细胞抗原（CD45）的抗体。对于多肽修饰的磁性纳米颗粒富集到的所有细胞进行三色染色，其中 DAPI+/CK+/CD45- 并且符合肿瘤细胞形态的细胞指认为循环肿瘤细胞。

以上所述 CTC 捕获和鉴定方法也是目前唯一一个通过美国 FDA 和中国 CFDA 的 CTC 捕获和鉴定方法。国内外大量临床研究结果表明，外周血循环肿瘤细胞的存在与否、浓度高低与肿瘤的早期发现、预后、复发和转移密切相关。

基于CTC的PD-L1检测体系的已经建立

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