免疫细胞治疗,肿瘤细胞免疫疗法,免疫细胞治疗技术,肿瘤细胞免疫治疗方法

　　2016年劳动节，因魏则西事件爆发，国内所有细胞免疫治疗的临床应用被国家卫计委紧急叫停，癌症细胞免疫治疗一度处于停滞状态。

　　直到2019年3月，卫健委发布关于征求体细胞治疗临床研究和转化应用管理办法(试行)(征求意见稿)意见的函。

　　解读中明确：体细胞治疗转化应用项目备案后可以转入临床应用，由申请备案的医疗机构按照国家发展改革委等4部门《关于印发推进医疗服务价格改革意见的通知》(发改价格〔2016〕1431号)有关要求，向当地省级价格主管部门提出收费申请。也就是说，体细胞治疗转化应用项目备案后可临床应用并可以收费!

　　体细胞治疗，具体而言，就是经体外刺激培养淋巴细胞后过继回输给癌症患者，进行肿瘤治疗的方法。通过采集人体自身免疫细胞，经过体外培养扩增数量，杀伤能力增强，回输到患者体内来杀灭癌细胞。

　　这种治疗手段最初建立于20世纪80年代，Rosenberg教授等观察到患有非免疫系统肿瘤的动物给予重组IL-2治疗后，动物的淋巴细胞可以调节肿瘤的消退和转移。

　　之后，人们先后培养出淋巴细胞因子激活的杀伤性细胞(LAK)，肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、CD3单抗激活的杀伤性细胞(CD3AK)和细胞因子激活的杀伤性细胞(CIK)。

　　近年来，非特异性免疫疗法DC疫苗、NK细胞治疗和特异性免疫疗法CAR-T疗法也取得了突破性进展。

　　NK细胞治疗

　　NK细胞又称自然杀伤细胞，是人体第三类淋巴细胞，其表面缺少T细胞和B细胞的特异性标志如TCR和Smlg，曾称为裸细胞。NK细胞最厉害的地方是，不需要抗原递呈过程，不用别人通风报信，就可以直接、快速将外来异物(病毒细菌感染细胞、癌细胞、衰老细胞等)就地正法。在人外周血中占淋巴细胞的5%-10%，作为免疫系统的核心部分，是人体内最有价值的先天性免疫细胞。

　　在面对癌细胞时，NK细胞不需要其他细胞的激活与刺激，便能直接识别并杀死癌细胞，因此，也被称为人体抗癌第一道防线。通俗点讲：NK细胞犹如人体内的“特种部队”。它会24小时不间断的在人体内巡逻，只有发现异常癌细胞，就会消灭。从源头上杜绝疾病发生和防止肿瘤发生、肿瘤复发和转移。

　　NK细胞杀伤功能如何实现的

　　NK细胞杀伤肿瘤细胞主要通过以下4个途径完成，分别是：

　　1.直接杀伤

　　NK细胞直接通过胞吐作用释放穿孔素和颗粒酶等细胞毒性颗粒，穿孔素在靶细胞表面穿孔，使颗粒酶b进入靶细胞诱导靶细胞凋亡。

　　2.诱导细胞凋亡活化NK细胞表达Fas(CD95)配体和TRAIL(TNF related apoptosis inducing ligand，肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体)分子，诱导CD95+靶细胞和TRAIL受体阳性的靶细胞通过内源酶的级联反应发生凋亡，使靶细胞进入程序性凋亡状态。

　　 NK细胞杀伤功能如何实现的

　　3.细胞因子介导杀伤NK细胞能合成和分泌多种细胞因子，如IFN-γ、TNF-α、IL1、IL5、IL8、IL10和G-CSF等，直接作用于靶细胞，或通过进一步激活其他种类免疫细胞攻击靶细胞。

　　4. 抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)

　　NK 细胞低亲和力的 CD16 分子与靶细胞 IgG 抗体复合物结合后，活化蛋白酪氨酸激酶(PTK)，使 PLC γ 的酪氨酸磷酸化，裂解膜磷酯酰肌醇为三磷酸肌醇(IP3)和二酰甘油，IP3增加细胞内游离钙浓度，进而释放细胞毒性物质(如穿孔素和颗粒酶)。

　　NK细胞治疗临床试验招募

　　NK细胞实际上是非常难以被进行人工处理的细胞，并且体外增殖能力很弱，即使获得了一定数目的NK细胞，其活性也会随着时间的流逝而失去，所以要想获得高数量且活性强的NK细胞是一件非常困难的事情。

　　经过几十年的临床研究，世界上已经实现了既增强了NK细胞活性，又成功增加了NK细胞的数量，完成了NK细胞回输体内对抗癌细胞必备的两项基本要求。目前，无论是中国、日本还是美国，NK细胞培养技术都已经非常成熟。　　

NK细胞临床试验	研究题目	截止日期	招募医院
胰腺癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌和结肠癌	活化的自然杀伤细胞(NK)诱导的抗肿瘤作用的临床研究	2021年9月30日	北京宣武医院
肝癌	异基因NK细胞治疗晚期肝细胞癌的安全性和有效性	2022年10月1日	解放军总医院第五医疗中心
肺癌	非小细胞肺癌患者输注NK和NKT细胞的临床疗效和安全性	2020年12月	湖南省肿瘤医院
肺腺癌	自体NK细胞免疫治疗对EGFR突变的晚期肺腺癌的影响:初步临床研究	2021年12月31日	深圳市罗湖医院
肺癌	NK细胞联合PD-1抗体作为晚期驱动基因突变阴性非小细胞肺癌二线治疗的初步研究	2020年5月16日	吉林大学第一医院
胰腺癌	ROBO1特异性BICAR-NK细胞治疗胰腺癌的临床研究	2021年5月	上海瑞金医院
恶性肿瘤	ROBO1特异性BICAR-NK/T细胞治疗恶性肿瘤的临床研究	2021年5月	上海交通大学医学院附属苏州九龙医院肿瘤科
急性白血病	患者细胞因子诱导的记忆样BK细胞的1/2期研究	2020年12月31日	华盛顿大学医院

　　树突细胞疫苗治疗

　　免疫细胞(白细胞)是人体健康最忠诚的守护神，它们参与免疫反应与免疫应答，在抵御细菌病毒入侵，杀伤癌细胞，维护人体免疫平衡健康方面，作用显著。

　　免疫系统中有几个最重要的成员，其中B细胞、T细胞、NK细胞是最熟悉的免疫细胞，他们参与机体的免疫防御功能，保障人体免受损伤。

　　另外，还有一种对于人体的免疫系统起着至关重要作用的免疫细胞，即树突状细胞(Dendritic Cell，又称DC细胞)，占总体免疫细胞的1%。DC细胞是人体内功能最强的抗原递呈细胞，如果免疫系统中，没有DC细胞携带抗原得T细胞，免疫细胞无法自行找到侵袭人体的异物(病毒、细菌、癌细胞)，人体的免疫功能将大打折扣。

　　DC细胞的抗原递呈作用处于免疫系统中心环节，不仅能通过抗原递呈作用来教育幼稚T细胞成为抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL), 还可与机体其他的免疫细胞如NK细胞、NKT细胞及B细胞相互作用，激活免疫系统，识别并杀伤肿瘤。

　　树突细胞是免疫系统的指挥官

　　基于DC细胞在免疫系统中的多功能作用，通过DC细胞负载癌抗原制备的DC 疫苗被广泛用于癌症临床研究及各类肿瘤治疗。因为DC细胞在整个免疫过程中充当的是总指挥的身份，可以调动机体其他的肿瘤杀伤细胞执行杀瘤过程。

　　人体的免疫系统中本来就有这种树突状细胞，但数量和活力都不够围歼癌变细胞的程度。有潜力成为树突状细胞的前体细胞可以通过一个特定的方法从血液中分离出来。借助于某种特定的信使，在试管中分离出来的细胞可以获得免疫能力。当前体细胞成熟为树突状细胞时，他们即可捕获特定的蛋白质(例如肿瘤抗原)。

　　树突疫苗已被国际广泛认可

　　美国树突疫苗：

　　2011年，美国FDA批准的DC疫苗——Provenge(sipuleucel-T)，治疗转移性前列腺癌，是全球首个也是目前唯一一个美国获批上市的DC疫苗。

　　日本树突疫苗：

　　日本厚生劳动省官方宣布将 DC 免疫疗法列入 A 级先进医疗技术，并已用于上万例晚期癌症病症的临床治疗。

　　德国树突疫苗：

　　德国相关部门审核通过的 DC 细胞制备实验室，允许运用 DC 免疫疗法治疗癌症患者。

　　树突细胞疫苗临床试验招募

　　因此，DC疫苗已经被国际医学抗肿瘤领域广泛认可，并已经应用于临床治疗，这是癌症患者治疗的新希望，也是无进展生存癌症的新方法。　　

DC细胞疫苗试验	研究题目	截止日期	招募医院
胃癌、肝癌、肺癌、肠癌	个性化DC(树突)疫苗用于癌症术后辅助治疗:胃癌、肝癌、非小细胞肺癌和大肠癌	2022年12月31日	苏川大学华西医院肿瘤中心医学肿瘤科
肝癌	基于个性化新抗原的树突状细胞疫苗联合微波消融治疗肝细胞癌的安全性、可行性和免疫原性	2020年10月15日	解放军总医院
肠癌	成熟树突状细胞疫苗接种对切除后的高突变大肠癌的初步研究	2020年10月	宾夕法尼亚大学
多发骨髓瘤	复发性多发骨髓瘤患者接种树突状细胞(DC)/骨髓瘤融合剂与Nivolumab的II期试验	2024年1月31日	贝斯以色列女执事医疗中心
卵巢癌	以树突细胞为基础的疫苗法的晚期卵巢癌患者的治疗中的作用	2020年7月	伯纳丁枢机主教癌症中心
胰腺癌	树突状细胞(白细胞)疫苗对胰腺癌的作用	2020年10月	宾夕法尼亚大学
黑色素瘤	晚期黑色素瘤患者抗突变抗原的成熟树突细胞疫苗接种	2020年12月	宾夕法尼亚大学
乳腺癌	乳腺癌新辅助治疗中的HER2定向接受树突状细胞疫苗	2021年3月	H. Lee Moffitt莫菲特癌症研究中心

　　CAR-T细胞治疗

　　从全球来看，细胞免疫治疗进展最迅速的类型是CAR-T疗法。其对传统治疗手段束手无策的血液瘤患者表现出突出的疗效，2017年8月，FDA批准诺华的CAR-T疗法Kymriah(tisagenlecleucel)白血病(ALL)。2个月后，FDA宣布批准了Kite Pharma公司CAR-T疗法Yescarta(axicabtagene ciloleucel)治疗特定类型大B细胞淋巴瘤。但是在实体瘤的攻克上CAR-T依然处在探索阶段，全球各地各项研究也在如火如荼的进行着。

　　CAR-T也获得日本厚生劳动省批准

　　2019年2月11日，据Japanese times(日本时报)报道，日本卫生部专家小组批准了嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)癌症治疗的生产和销售。该疗法将用于25岁或以下的B细胞急性淋巴细胞白血病患者和弥漫性大B细胞淋巴瘤患者，这些患者无法通过现有的抗癌药物无进展生存。

　　这些治疗方法已经证实可以诱发的显着反应 - 即使是生存期仅仅几个月的晚期癌症患者也可以完全根除，在某些情况下强烈响应持续数月甚至数年。

　　比如白血病女孩艾米莉已被CAR-T细胞疗法成功无进展生存7年，她也成为这一史诗级疗法的代言人被载入史册。

　　2019年的艾米莉(无癌7年)

　　 2019年的艾米莉（无癌7年）

　　CAR-T疗法开发者Carl June博士同艾米莉参加活动

　　CAR-T临床试验招募

　　目前，国内的CAR-T疗法已经处在临床试验阶段。中国是除美国之外进行Car-T临床研究最多的国家，全球CAR-T临床试验已达718项，其中美国以284项高居榜首，中国以228项位列第二。目前中国的Car-T细胞临床试验已经取得了优异的临床数据。

　　可喜的是，这种有无进展生存癌症可能CAR-T疗法已经问世中国，很多国内的医院都在招募CAR-T疗法的临床试验。

　　小编从美国clinicaltrials(临床试验)官网上中国200多项的CAR-T研究中，给您查询了一些CAR-T临床试验招募信息，供参考(篇幅有限，仅列出部分)。

　　实体瘤CAR-T临床试验(仅列出部分)　　

CAR-T疗法名称	适应症-实体瘤	招募医院	截止日期
HER2/Mesothelin/Lewis-Y/PSCA/MUC1/PD-L1/CD80/86-CAR-T细胞免疫之劳肺癌	肺癌	中山大学附属第一医院	2020年8月1日
PD-1基因敲除间皮素定向CAR-T细胞治疗实体瘤	成人实体瘤	解放军总医院	2019年11月
IM21 CAR-T细胞在复发性或难治性BCMA阳性多发性骨髓瘤	多发性骨髓瘤	北京协和医院	2020年10月10日
靶向Claudin18.2 CAR-T细胞疗法治疗实体肿瘤	胃癌、胃食管交界癌和胰腺癌	北京大学肿瘤医院	2020年3月20日
肝动脉输注CD147靶向CAR-T治疗晚期肝细胞癌的研究	肝癌	第四军医大学西京医院	2020年10月27日
MUC-1 CART治疗肝内胆管细胞癌的安前行和有效性屏蔽	肝内胆管癌	浙江大学医学院附属第二医院	2023年8月31日
第四代CART细胞治疗难治性复发的卵巢癌	卵巢癌	上海市第六人民医院	2020年1月
EGFRvIII/DR5/NY-ESO-1/Mesothelin CAR-T/TCR-T细胞免疫治疗固体恶性肿瘤	食道癌、胃癌、胶质瘤、肝癌等	河南省人民医院	2020年12月1日
CCT301-59 CAR-T治疗复发性或难治性实体瘤	实体肿瘤、软组织肉瘤、胃癌、胰腺癌、膀胱癌	上海市中山医院	2021年2月28日

　　血液肿瘤CAR-T临床试验(仅列出部分)　　

CAR-T疗法名称	适应症-血液肿瘤	招募医院	截止日期
CD-19-CAR-T细胞治疗B细胞白血病	B细胞急性淋巴细胞白血病	河北燕达陆道培医院	2019年12月31日
多靶点基因修饰CAR-T/TCR-T细胞自体免疫治疗没醒肿瘤	B细胞急性白血病、淋巴瘤、髓细胞白血病、多发性骨髓瘤、肝癌、胃癌、胰腺癌、间皮瘤、大肠癌、食管癌、肺癌、胶质瘤、黑色素瘤、滑膜肉瘤、卵巢癌、肾癌	郑州大学第一附属医院	2023年3月1日
MC-19 PD1 CAR-T治疗复发或难治性B细胞淋巴瘤的安全性及有效性	B细胞淋巴瘤	北京大学肿瘤医院	2021年5月1日
通用双特异性CD19和CD20或CD22 CAR-T细胞免疫治疗复发或难治性白血病和淋巴瘤可行性和安全性	B细胞白血病、B细胞淋巴瘤	解放军总医院	2022年5月20日
CD19 CAR-T治疗复发和难治性CD19阳性淋巴瘤	弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤	复旦学大中山医院	2021年10月